組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體用于研究組蛋白去乙?;^(guò)程,組蛋白去乙?;侨梭w細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的基本活動(dòng)。
組蛋白去乙?;且环N重要的表觀遺傳學(xué)修飾,它通過(guò)調(diào)節(jié)基因的表達(dá)來(lái)影響細(xì)胞的功能和命運(yùn)。組蛋白去乙酰化酶是負(fù)責(zé)這種修飾的酶,它們能夠從組蛋白上移除乙酰基團(tuán),從而改變組蛋白的電荷和結(jié)構(gòu),進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。組蛋白去乙酰化酶在許多生物學(xué)過(guò)程中都發(fā)揮著重要的作用。例如,在細(xì)胞分化過(guò)程中,組蛋白去乙?;缚梢哉{(diào)節(jié)關(guān)鍵基因的表達(dá),從而影響細(xì)胞的分化方向。此外,在腫瘤發(fā)生過(guò)程中,組蛋白去乙酰化酶也可以調(diào)節(jié)腫瘤抑制基因和致癌基因的表達(dá),從而影響腫瘤的生長(zhǎng)和進(jìn)展。
目前存在許多依賴于使用組蛋白去乙酰化酶(HDAC)抗體來(lái)探索生物樣品中存在的蛋白質(zhì)并觀察它們?nèi)绾闻c其他生物分子相互作用的測(cè)定,這可以揭示有關(guān)各種因素的信息。包括 DNA下拉、ChIP、免疫組化和蛋白質(zhì)印跡在內(nèi)的檢測(cè)都使用了這種抗體。從這些方法中受益匪淺的領(lǐng)域包括癌癥研究和藥理學(xué)。
組蛋白去乙酰化酶(HDAC)抗體的意義
人體細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的基本過(guò)程,如細(xì)胞周期的進(jìn)展、轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)和其他發(fā)育活動(dòng),依賴于乙?;瘷C(jī)制及其反向過(guò)程,即脫乙?;?,即駐留在DNA組蛋白內(nèi)的賴氨酸殘基的脫乙酰化,特別是在N末端尾部結(jié)構(gòu)域內(nèi)。
組蛋白去乙酰酶(HDAC)和組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)對(duì)乙酰化過(guò)程至關(guān)重要。通常,核小體縮合和轉(zhuǎn)錄抑制等活動(dòng)與脫乙?;^(guò)程有關(guān)。
在組蛋白脫乙酰過(guò)程中,組蛋白去乙酰化酶(HDAC)催化乙酰官能團(tuán)從組蛋白中去除。這可以通過(guò)使用利用組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體的方法來(lái)查看。組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)的活性導(dǎo)致乙酰化水平降低,可以通過(guò)染色質(zhì)縮合狀態(tài)發(fā)生的基因表達(dá)的相關(guān)抑制來(lái)測(cè)量。
研究發(fā)現(xiàn)了許多組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體,它們分為四個(gè)離散的組。一類抗體主要存在于細(xì)胞核內(nèi)。在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)二類抗體,大約是一類抗體大小的兩倍。第三類占據(jù)細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),并被NADH激活。最后的第四類只分配了一種抗體,HDAC11。
在研究中的用途
組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體可用于了解細(xì)胞內(nèi)的組蛋白去乙酰化。許多研究方法依靠這些抗體來(lái)檢測(cè)和分析生物樣品中存在的蛋白質(zhì)以及它們?nèi)绾蜗嗷プ饔谩K鼈兡壳笆且韵卵芯糠椒ǖ年P(guān)鍵:
DNA下拉分析:DNA下拉測(cè)定用于檢測(cè)蛋白質(zhì)相互作用,可以從生物樣品中提取蛋白質(zhì)DNA復(fù)合物。該方法涉及使用DNA探針,該探針通過(guò)使用針對(duì)靶蛋白的抗體來(lái)分離。然后可以通過(guò)進(jìn)一步分析(通常是PCR或Southern Lot跡)來(lái)鑒定與蛋白質(zhì)結(jié)合的未知DNA序列。例如,這些類型的研究已被用于揭示某些基因表達(dá)在疾病中的作用,例如在癌癥中的作用。
ChIP 檢測(cè):
ChIP 或染色質(zhì)免疫沉淀是一種穩(wěn)健且適應(yīng)性強(qiáng)的檢測(cè)方法,用于觀察細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)-DNA 相互作用。它還可以識(shí)別同時(shí)與特定基因組相關(guān)的多種蛋白質(zhì),以及識(shí)別與特定蛋白質(zhì)相關(guān)的基因組。組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體已用于這些測(cè)試場(chǎng)景,具體而言,它們已用于揭示與癌癥發(fā)展相關(guān)的蛋白質(zhì)相互作用。
免疫組織化學(xué):
免疫組織化學(xué)過(guò)程涉及識(shí)別生物樣本細(xì)胞內(nèi)的抗原(蛋白質(zhì)),它是最常見(jiàn)的免疫染色技術(shù)。它利用了抗體與生物樣品中的某些抗原結(jié)合的事實(shí)。組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體通常用于該測(cè)定。同樣,該方法已用于癌癥研究領(lǐng)域,并且已經(jīng)能夠確定涉及組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抑制劑的淋巴惡性腫瘤的可能新治療途徑。
蛋白質(zhì)印跡測(cè)定:
蛋白質(zhì)印跡,也稱為免疫印跡,是檢測(cè)生物組織內(nèi)蛋白質(zhì)的常用技術(shù)。它涉及通過(guò)電泳分離,然后用抗體染色。組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體通常用于染色過(guò)程。用這些抗體染色有助于揭示腫瘤生長(zhǎng)和進(jìn)展的機(jī)制。
研究領(lǐng)域
使用組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體的潛在研究領(lǐng)域是巨大的。然而,在某些領(lǐng)域,使用這些抗體已被證明更為基本。癌癥的研究從組蛋白去乙?;福?/span>HDAC)抗體的工作中受益匪淺。上述測(cè)定已成功用于揭示支持不同類型癌癥發(fā)生和生長(zhǎng)的各種過(guò)程的細(xì)節(jié)。他們已經(jīng)能夠強(qiáng)調(diào)特定基因的重要性,并提出它們?nèi)绾斡绊懓┌Y。此外,藥理學(xué)也依賴于這種抗體在新藥的開(kāi)發(fā)和測(cè)試中的使用。它們已被用于幫助確定如果藥物將用于其預(yù)期用途,它們將如何起作用,以及它們的效率可能是多少。