1.載體構(gòu)建
(1)可將cDNA克隆至客戶(hù)或者普健生物提供的哺乳細(xì)胞的表達(dá)載體中
(2)可在表達(dá)載體中添加分泌信號(hào)肽和純化標(biāo)簽滿(mǎn)足一步親和純化的需求
(3)能生產(chǎn)并鑒定高效穩(wěn)定細(xì)胞系,適合大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)
2.穩(wěn)定基因表達(dá)符合長(zhǎng)期生產(chǎn)需求,整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作流程提供長(zhǎng)期穩(wěn)定及規(guī)??烧{(diào)的蛋白生產(chǎn)
3.瞬時(shí)表達(dá)(TGE)
(1)與穩(wěn)定基因表達(dá)相比,TGE主要適用于短期內(nèi)制備重組蛋白,一般在10天內(nèi)即可快速轉(zhuǎn)染,無(wú)需質(zhì)粒DNA的遺傳性選擇
(2)普健生物的瞬時(shí)表達(dá)使用懸浮細(xì)胞,能夠完成毫升到100L的體積的蛋白表達(dá)
4.工藝過(guò)程開(kāi)發(fā)及擴(kuò)大規(guī)模。普健生物能夠優(yōu)化表達(dá)過(guò)程以及表達(dá)產(chǎn)物,預(yù)測(cè)細(xì)胞表達(dá)量,摸索發(fā)酵罐發(fā)酵條件,適合大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)
5.純化:普健生物擁有完善的蛋白純化系統(tǒng),親和純化,凝膠過(guò)濾,離子交換及疏水層析等純化方法,能夠完成各類(lèi)型蛋白的純化,以及純化工藝的摸索
普健生物提供表達(dá)載體構(gòu)建、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、表達(dá)測(cè)試及大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞發(fā)酵和蛋白純化等一站式蛋白技術(shù)服務(wù)。
表達(dá)方式 |
細(xì)胞 |
瞬時(shí)表達(dá) |
HEK293,HEK293細(xì)胞來(lái)源于293細(xì)胞系,采用無(wú)血清懸浮培養(yǎng)CHO-S,CHO-S細(xì)胞是來(lái)自中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞的克隆分離株,被馴化為無(wú)血清懸浮培養(yǎng) |
穩(wěn)定表達(dá) |
CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而來(lái),該細(xì)胞株培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、貼壁強(qiáng)度適中,比較容易轉(zhuǎn)染 |
穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建 |
DG44,DG44 細(xì)胞(二氫葉酸還原酶缺陷型 , DHFR-)由中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞衍生而來(lái),常用于構(gòu)建適合重組蛋白生產(chǎn)的細(xì)胞系。DG44細(xì)胞篩選和共擴(kuò)增標(biāo)記是DHFR基因(dhfr) |
表達(dá)載體:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等