據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年因食用有毒蘑菇而死亡的人中有90%是由死亡帽菇(Amanita phalloides)引起的。這個(gè)一直被稱為“國王殺手”的死亡帽菇可能正在失去它的優(yōu)勢(shì)，因?yàn)榭茖W(xué)家們已經(jīng)找到可能的方法來對(duì)付這種致命的蘑菇毒素。
死亡帽菇(Amanita phalloides)也叫死亡帽、毒鵝膏，被認(rèn)為是世界上最毒的蘑菇，它的外表看起來很平平無奇，但卻含有鬼筆毒素與鵝膏蕈堿兩種致命毒物，僅僅30毫克就能夠?qū)е氯祟愃劳?，但中毒癥狀通常在食用8小時(shí)后才會(huì)出現(xiàn)。死亡帽高15厘米，頂部通常呈現(xiàn)黃褐色或黃綠色，味道鮮美，但食用后會(huì)導(dǎo)致嘔吐、癲癇、嚴(yán)重的肝損傷和死亡。
因此科學(xué)家們一直在研究死亡帽的致死機(jī)制，最近題為《Identification of indocyanine green as a STT3B inhibitor against mushroom α-amanitin cytotoxicity》的研究中，研究人員通過研究人體內(nèi)生化反應(yīng)的機(jī)制，發(fā)現(xiàn)一種可以阻斷蘑菇毒素(α-amanitin)進(jìn)入細(xì)胞的化學(xué)物質(zhì)吲哚菁綠，文章在線發(fā)表于Nature子刊《Nature Communications》。
科學(xué)家們首先使用CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)創(chuàng)建了一個(gè)人類細(xì)胞庫，每個(gè)細(xì)胞都有不同基因的突變。然后，他們測(cè)試了哪些突變幫助細(xì)胞在暴露于α- amantin中存活下來。這些高通量CRISPR篩選已被廣泛用于鑒定與耐藥性有關(guān)的基因或途徑。
研究人員首先進(jìn)行了全基因組CRISPR功能喪失篩選，以確定與AMA細(xì)胞毒性有關(guān)的基因和途徑。全基因組CRISPR篩選揭示了缺乏稱為STT3B的酶的功能細(xì)胞能夠在α- amantin中存活。n -聚糖生物合成途徑及其關(guān)鍵組分STT3B在α- amantin毒性中起著至關(guān)重要的作用，STT3B是α-amanitin毒性所必需的，并且研究人員篩選了大約3200種化合物，尋找到一種可以阻止STT3B作用的化合物——吲哚菁綠（ICG），ICG是STT3B抑制劑。
CRISPR篩選識(shí)別AMA毒性所需的基因和途徑
吲哚菁綠（ICG）是由柯達(dá)攝影公司在上世紀(jì)50年代開發(fā)的染料，此后一直用于醫(yī)學(xué)成像，例如，可視化眼睛中的血管和肝臟中的血流。在對(duì)比試驗(yàn)中，使用ICG的小鼠中只有約50%死于α-amanitin中毒，而安慰劑組小鼠為90%。
通過將α-amanitin毒性的全基因組CRISPR篩選與計(jì)算機(jī)藥物篩選和體內(nèi)功能驗(yàn)證相結(jié)合，強(qiáng)調(diào)了ICG作為針對(duì)蘑菇毒素的STT3B抑制劑可以在體內(nèi)和體外阻斷AMA誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡，表明ICG在AMA /死亡帽中毒方面的潛在實(shí)用價(jià)值。
