前文提要

免疫療法治療癌癥因其副作用小、抗腫瘤活性高、適應(yīng)癥廣，已成為繼手術(shù)、放療、化療等常規(guī)治療之后的第四大癌癥治療方式。以免疫檢查點(diǎn)PD-1/PD-L1抑制劑為代表的新興免疫治療方法成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。這種方法主要針對(duì)腫瘤免疫逃逸機(jī)制，通過(guò)阻斷PD-1/PD-L1通路，從而激活效應(yīng)T細(xì)胞的抗腫瘤免疫反應(yīng)。然而臨床研究發(fā)現(xiàn)，PD-1/PD-L1的抗體大概只對(duì)20%-30%的實(shí)體瘤有效。

2019年3月,來(lái)自于美國(guó)耶魯大學(xué)的華人科學(xué)家陳列平教授課題組在《Nature Medicine》上發(fā)表文章,提出了一個(gè)新的免疫檢查點(diǎn)：Siglec-15,Siglec-15的表達(dá)與PD-L1相互排斥，說(shuō)明這兩種分子可能通過(guò)完全不同的機(jī)制介導(dǎo)免疫抑制，針對(duì)Siglec-15的抗體可以很好的和PD-1抗體在癌癥免疫治療方面互為補(bǔ)充，為此類(lèi)針對(duì)PD-1抗體無(wú)效的實(shí)體瘤提供新的治療希望。

什么是Siglec-15

Siglec-15(CD33 L3 protein) 是唾液酸結(jié)合的免疫球蛋白樣凝集素家族(Siglec)的一員。Siglec家族是一類(lèi)可以識(shí)別唾液酸糖鏈的脊椎動(dòng)物細(xì)胞表面受體，可以參與免疫細(xì)胞活化、增殖以及凋亡的調(diào)控，屬于一次穿膜的Ⅰ型膜蛋白，具有非常典型和保守的結(jié)構(gòu)特征。其家族不同成員的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)如下圖所示：

Siglec-15，由一個(gè)244個(gè)氨基酸的胞外結(jié)構(gòu)域(ECD)組成，包含一個(gè)免疫球蛋白可變區(qū)(IgV)和一個(gè)II型恒定區(qū)(IgC2),一個(gè)跨膜段和一個(gè)細(xì)胞質(zhì)域。

人類(lèi)Siglec-15的DNA序列和氨基酸序列如下圖所示：

Siglec-15與B7家族具有超過(guò)30%以上的同源性(同源性比對(duì)如下圖所示)，說(shuō)明可能與B7家族一樣，具有免疫調(diào)節(jié)作用：

Siglec-15參與的細(xì)胞信號(hào)通路

Siglec-15可以參與破骨細(xì)胞的分化,如下圖,破骨細(xì)胞分化主要由RANKL-RANK信號(hào)通路驅(qū)動(dòng)。Siglec-15可以識(shí)別破骨細(xì)細(xì)胞前體上的CD44，通過(guò)DAP12-SYK通路轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)，該通路與RANK-TRAF6通路交叉作用增強(qiáng)下游信號(hào)(如ERK和PI3K-AKT)，從而參與破骨細(xì)胞的分化。

Fig 3.Osteoclast fusion

Siglec-15還與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等息息相關(guān)，如下圖所示，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞和癌細(xì)胞上的siglec-15可以激活T細(xì)胞上的未知受體，對(duì)特異性T細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用。

Fig 4.Cancer/Microbial infectin

Siglec-15相關(guān)文獻(xiàn)研究

陳列平教授實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)了一種針對(duì)Siglec-15的抗體:α-S15，發(fā)現(xiàn)其可以阻斷Siglec-15對(duì)于特異性T細(xì)胞的抑制作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)小鼠全身敲除Siglec-15基因后，小鼠免疫系統(tǒng)一切正常，通過(guò)流式檢測(cè)，敲除Siglec-15的小鼠的特異性T細(xì)胞的反應(yīng)性更強(qiáng)。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)Siglec-15是通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)而不是細(xì)胞凋亡來(lái)抑制特異性T細(xì)胞的反應(yīng)。

實(shí)驗(yàn)中測(cè)試了野生型BMDMs(表達(dá)Siglec-15)和敲除Siglec-15的小鼠BMDMs對(duì)鼠源結(jié)腸癌MC38腫瘤的影響。發(fā)現(xiàn)來(lái)源于野生型小鼠的BMDMs顯著促進(jìn)MC38腫瘤生長(zhǎng)，而不表達(dá)Siglec-15的BMDMs對(duì)MC38腫瘤沒(méi)有影響。當(dāng)α-S15和野生型BMDMs混合后，同樣抑制了腫瘤的生長(zhǎng)，說(shuō)明Siglec-15的促腫瘤效應(yīng)被抗體消除。

一系列的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：Siglec-15作為免疫治療新靶標(biāo)具有非常大的潛力和可行性，為治療實(shí)體瘤提供新的方向和希望。

Siglec-15藥物研發(fā)現(xiàn)狀

上市藥物數(shù)量：暫無(wú)

最高研發(fā)階段：臨床 II 期（失?。⑴R床前期（在研）

NC318是目前唯/一一款進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的Siglec-15單抗，是NextCure公司研發(fā)管線中的領(lǐng)軍候選藥物。2019年11月，NextCure公布了NC318良好的一期臨床數(shù)據(jù)，業(yè)界對(duì)其治療PD-1抗體耐藥患者寄予厚望。但在2020年7月，NextCure公布了NC318的單藥治療1/2期臨床研究進(jìn)展，結(jié)果卻不盡人意，并宣布終止NC318單藥治療非小細(xì)胞肺癌和卵巢癌的進(jìn)一步研究。

目前Siglec-15在藥物研發(fā)方面尚無(wú)突破性進(jìn)展,有專(zhuān)家指出，Siglec-15仍舊值得繼續(xù)深入挖掘研究。NC318的臨床研究在經(jīng)歷了萬(wàn)眾期待、激動(dòng)人心，到爆冷門(mén)、滑鐵盧，讓我們深知藥物研發(fā)并不是一帆風(fēng)順的，往往會(huì)出現(xiàn)不確定性且過(guò)程極為跌宕起伏。Siglec-15未來(lái)能否重整旗鼓，相信時(shí)間會(huì)告訴我們答案。

關(guān)于我們

普健生物(AtaGenix)創(chuàng)立于2012年，十年來(lái)專(zhuān)注于蛋白、抗體定制服務(wù)，具備各種先進(jìn)的蛋白表達(dá)和抗體開(kāi)發(fā)技術(shù)平臺(tái)，專(zhuān)業(yè)的研發(fā)生產(chǎn)團(tuán)隊(duì)，可提供全面的蛋白表達(dá)、抗體制備、抗體藥物發(fā)現(xiàn)、抗體人源化、重組抗體表達(dá)等一站式抗體發(fā)現(xiàn)技術(shù)服務(wù)。

關(guān)于AntibodySystem

2013年，普健生物與法國(guó)ProteoGenix建立海外技術(shù)服務(wù)合作伙伴關(guān)系。作為法國(guó)知名的抗體藥物開(kāi)發(fā)服務(wù)提供商，2019年P(guān)roteoGenix創(chuàng)立AntibodySystem獨(dú)立品牌，致力于為全球藥物開(kāi)發(fā)和基礎(chǔ)科學(xué)研究提供高質(zhì)量的蛋白，抗體產(chǎn)品。普健生物作為AntibodySystem在亞洲區(qū)授權(quán)總代理，攜手法國(guó)ProteoGenix，為亞洲廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的科研產(chǎn)品。

AntibodySystem關(guān)于Siglec-15相關(guān)產(chǎn)品展示

Catalog No：EHK13701

Name:Recombinant Human SIGLEC15/CD33L3 Protein, C-Fc

Predicted molecular weight：54.80 kDa

Expression system: Mammalian

Protein length: Met1-Gly260

Stock: In stock

SDS PAGE Purity：90%

SDS PAGE for:Recombinant Human SIGLEC15/CD33L3 Protein, C-Fc

Catalog No：EHK13702

Name:Recombinant Human SIGLEC15/CD33L3 Protein, C-His

Predicted molecular weight：29.61 kDa

Expression system: Mammalian

Protein length: Met1-Thr263

Stock: In stock

SDS PAGE Purity：90%

SDS PAGE for:Recombinant Human SIGLEC15/CD33L3 Protein, C-His

Catalog No：FHK13720

Name:Anti-Human SIGLEC15/CD33L3 Antibody (25E9#)

Applications：FCM

Host species：Human

Isotype：IgG1,kappa

Stock: In stock

Flow cytometry analysis with Anti-Human SIGLEC15/CD33L3 mAb (25E9#) 5 μg/ml (FHK13720) on XtenCHO cells

Catalog No：FHK13710

Name:Anti-Human SIGLEC15/CD33L3 Antibody (A9E8)

Applications：FCM

Host species：Mouse

Isotype：IgG1,kappa

Stock: In stock

Flow cytometry analysis with Anti-Human SIGLEC15/CD33L3 mAb (A9E8) 5 μg/ml (FHK13710) on XtenCHO cells

參考文獻(xiàn)

[1] Wang J, Sun J, Liu LN, et al. Siglec-15 as an immune suppressor and potential target for normalization cancer immunotherapy. Nat Med 2019; 25: 656–666.

[2] Siglec-15: an attractive immunotherapy target. Cancer Discov 2020; 10: 7–8.

[3] Takashi Angata.Siglec-15: a potential regulator of osteoporosis, cancer, and infectious diseases. Angata Journal of Biomedical Science 2020;27:10

[4] Takashi Angata , Yukako Tabuchi,et al.Siglec-15: an immune system Siglec conserved throughout vertebrate evolution. Glycobiology 2007;17: 838–846.

[5] Xianlong Chen , Shengwei Mo,et al. Analysis of a novel immune checkpoint, Siglec-15, in pancreatic ductal adenocarcinoma. The Journal of Pathology: Clinical Research 2022; 8: 268–278.

[6] Yoshiharu Hiruma, Takehiro Hirai, Eisuke Tsuda.Siglec-15, a member of the sialic acid-binding lectin, is a novel regulator for osteoclast differentiation. Biochemical and Biophysical Research Communications 2011;409:424-429