這里有一個(gè)技術(shù)難題等你解鎖
卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病隱匿，致死率占各類婦科腫瘤的首位。研究卵巢癌發(fā)生、復(fù)發(fā)和耐藥機(jī)制等，有針對(duì)性地制定治療策略刻不容緩。如何高效地從卵巢癌中分離培養(yǎng)卵巢癌細(xì)胞，對(duì)卵巢癌的研究至關(guān)重要。
為此，我們做了什么技術(shù)突破
成功在體外培養(yǎng)了原位卵巢癌，算不算
并且使該卵巢癌在體外可增殖哦
后期還會(huì)用于藥物藥敏篩選呢
悄悄告訴你，我們培養(yǎng)細(xì)胞有一套
采用新型3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
養(yǎng)好細(xì)胞不再難
有人會(huì)說，不就養(yǎng)個(gè)細(xì)胞，有什么難的
真的挺難的~不信你看~
獲得2例卵巢癌患者的捐贈(zèng)組織，進(jìn)行了2D培養(yǎng)與3D培養(yǎng)。
經(jīng)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)：2例卵巢細(xì)胞在傳統(tǒng)的平面培養(yǎng)上，細(xì)胞形態(tài)并未發(fā)現(xiàn)明顯的差異，在一周內(nèi)還具有卵巢癌荷包蛋特征樣細(xì)胞形態(tài)，同時(shí)也含有一些貼壁生長的間質(zhì)細(xì)胞，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長，卵巢癌細(xì)胞逐漸退化或死亡，其生長空間被間充質(zhì)細(xì)胞所占據(jù)（見圖1）。這是目前原位腫瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)的一道瓶頸。
圖1. 2例捐獻(xiàn)者分離細(xì)胞在2D培養(yǎng)條件下的生長情況
在三維培養(yǎng)條件下，可見細(xì)胞密度隨培養(yǎng)時(shí)間的增加在逐漸增多且生長良好，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長并未出現(xiàn)平面培養(yǎng)上的纖維狀細(xì)胞逐漸增多的現(xiàn)象，可見三維培養(yǎng)更有利于腫瘤細(xì)胞的生長（見圖2）。同時(shí)，我們還通過MTT法檢測(cè)了細(xì)胞在材料中的增殖情況（見圖3）發(fā)現(xiàn)：細(xì)胞的增殖活性與細(xì)胞狀態(tài)呈正相關(guān)，患者1較患者2組織分離獲得的細(xì)胞活性低，這可能是卵巢癌的種類與分級(jí)有關(guān)。
圖2. 2例捐獻(xiàn)者分離細(xì)胞在3D培養(yǎng)條件下的生長情況
圖3. 2例捐獻(xiàn)者分離細(xì)胞在3D培養(yǎng)條件下的增殖情況
從三維培養(yǎng)的增殖檢測(cè)數(shù)據(jù)也不難發(fā)現(xiàn)，在體外三維培養(yǎng)條件下癌細(xì)胞的增殖速度逐漸減緩，這也更契合生物體內(nèi)腫瘤的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，腫瘤細(xì)胞雖較正常細(xì)胞增殖迅速，但在體內(nèi)腫瘤潛伏期及腫瘤灶轉(zhuǎn)移等均是一個(gè)隱秘而漫長的過程。
針對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件培養(yǎng)的2例卵巢癌細(xì)胞的三維形態(tài)，我們對(duì)照卵巢癌組織的病理分型特征，對(duì)此2例卵巢癌腫瘤進(jìn)行了初步診斷，獲得以下結(jié)論：
1. 患者2的卵巢癌腫瘤分級(jí)高于患者1；
2. 從三維細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)上，患者1分離獲得的卵巢癌細(xì)胞呈荷包蛋樣且細(xì)胞大小不一，在分離處理過程中有大量黃色黏液流出，且在分離初期細(xì)胞多聚團(tuán)，考慮為黏液性卵巢癌；
3. 從三維細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)上，患者2分離獲得的卵巢癌細(xì)胞細(xì)胞個(gè)大，呈顯著的荷包蛋樣且增殖速度較快，腫瘤細(xì)胞惡性程度較高，可能為上皮性囊腔腫瘤，可能存在轉(zhuǎn)移灶。
實(shí)驗(yàn)取得了令人振奮的結(jié)果：
經(jīng)與患者病理檢測(cè)報(bào)告對(duì)比，最終發(fā)現(xiàn)我們根據(jù)三維培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)得到的初步判斷結(jié)果與最終病理檢測(cè)結(jié)果基本一致。
特別說明：本實(shí)驗(yàn)由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院·陳剛教授團(tuán)隊(duì)，提供卵巢癌組織材料及技術(shù)指導(dǎo)。
到此我們不得不提
本項(xiàng)研究最關(guān)鍵的技術(shù)——3D細(xì)胞培養(yǎng)
成功解決細(xì)胞培養(yǎng)這一技術(shù)難題
3D細(xì)胞培養(yǎng)是一種模擬體內(nèi)三維生長環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)方式。通過讓細(xì)胞聚集成3D球體或者將細(xì)胞在成分結(jié)構(gòu)類似于實(shí)體組織的三維結(jié)構(gòu)載體上粘附、伸展和生長，從時(shí)間和空間上共同調(diào)控細(xì)胞的增殖和分化，使組織結(jié)構(gòu)和功能得以較大程度保留。
與2D培養(yǎng)相比，3D培養(yǎng)更真實(shí)地再現(xiàn)了細(xì)胞與細(xì)胞之間以及細(xì)胞與細(xì)胞間微環(huán)境的相互作用，更準(zhǔn)確地模擬組織在正常生理狀態(tài)下情況及反應(yīng)，突破了傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)耗時(shí)繁瑣，細(xì)胞產(chǎn)量微小等局限性。
應(yīng)用：隨著3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不斷完善，以此為基礎(chǔ)的新型高通量藥物檢測(cè)及篩查系統(tǒng)正在成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域的技術(shù)新熱點(diǎn)，并逐漸在藥物研發(fā)、療效評(píng)估，毒性檢測(cè)及臨床檢測(cè)等方面發(fā)揮著越來越廣泛的作用。
重磅出擊
(Atagenix—3D細(xì)胞培養(yǎng))
我們的3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)秘籍
——新型的3D細(xì)胞培養(yǎng)材料AccuraMatrix
國際領(lǐng)先、自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型生物構(gòu)架，用于體外細(xì)胞3D培養(yǎng)及類組織器官（Organoid）的建立。
1高純度、低免疫原性；
2多層氣孔基質(zhì)：與生理細(xì)胞外基質(zhì)相似；
3細(xì)胞附著的可質(zhì)子化表面：增強(qiáng)細(xì)胞附著；
4可調(diào)節(jié)物理和化學(xué)性質(zhì)的基質(zhì)材料：滿足不同類型細(xì)胞生長的特定要求；
5使用廣泛，可應(yīng)用于細(xì)胞生長和分化、干細(xì)胞研究、代謝和毒理學(xué)研究、體內(nèi)外血管生長研究、體外腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性研究、腫瘤異種移植模型研究等領(lǐng)域。
