基因工程技術(shù)作為現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)的核心，被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、環(huán)境、能源、醫(yī)藥以及農(nóng)牧業(yè)等領(lǐng)域。其關(guān)鍵技術(shù)是DNA的連接和重組，而在此過(guò)程中發(fā)揮重要作用的就是核酸工具酶。
核酸工具酶種類繁多、功能各異，主要包括限制酶、聚合酶、連接酶、修飾酶和核酸酶等。這些酶具有特異性的序列識(shí)別能力以及高效的催化活性，在一定的條件下可以對(duì)核酸進(jìn)行切割、連接、擴(kuò)增及修飾等，反應(yīng)條件溫和且具有出色的生物相容性，因此，被廣泛地應(yīng)用于核酸、蛋白質(zhì)和小分子等生物活性分子的分析檢測(cè)。
具體的各種酶的功能，大家應(yīng)該都比較清楚（不清楚的請(qǐng)去留言），這里不過(guò)多贅述，我們聊聊大家比較關(guān)心的問題——酶能不能達(dá)到預(yù)期效果。別人的不清楚，我們普健自產(chǎn)的幾個(gè)核酸工具酶，效果還是不錯(cuò)的。
核酸工具酶
AtaGenix 全能核酸酶
Benzonase Nuclease全能核酸酶，是一種經(jīng)過(guò)基因工程改造的核酸內(nèi)切酶。它能夠在非常廣泛的條件下（6 M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF）降解所有形式的（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀或超螺旋形式）DNA和RNA。全能核酸酶不特異性識(shí)別堿基序列，可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割，廣泛用于去除生物制品中的核酸。
經(jīng)長(zhǎng)期項(xiàng)目檢驗(yàn)，純化中可有效降低蛋白樣品粘度，去除蛋白樣品中核酸的污染。
試劑兼容性高，可用于去除細(xì)胞、病毒等實(shí)驗(yàn)中的核酸，也可用于去除生化分析樣品中的核酸。
高效的核酸消化能力，酶活>800U/μL，比活>1.0×106U/mg，降解所有形式的DNA和RNA。
嚴(yán)格質(zhì)控，每個(gè)批次產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)活性和功能驗(yàn)證，保證產(chǎn)品質(zhì)量。
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AtaGenix Benzonase Nuclease全能核酸酶
Taq DNA Polymerase
Taq DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶和微弱的5'→3'核酸外切酶的能力，但沒有3'→5'外切酶的能力，這意味著在3'末端會(huì)出現(xiàn)一個(gè)dA突出。利用該特性，它可被用于TA克隆。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase，TdT），是一種模板依賴的 DNA 聚合酶，可以催化在寡核苷酸、單鏈或雙鏈DNA的 3’羥基端加上dNTP，最短可催化3個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的寡核苷酸。
我們還有另一類工具酶
蛋白工具酶
這類蛋白研究工具酶是由普健生物經(jīng)過(guò)基因工程改造和純化后的重組蛋白酶，具有識(shí)別特異性氨基酸序列位點(diǎn)，并將對(duì)應(yīng)蛋白標(biāo)簽切割下來(lái)的作用。
IdeS Protease
IdeS具有獨(dú)特的底物選擇性，高度特異性的IgG切割，快速生成高純度的片段，可以作為工具酶應(yīng)用于抗體類藥物或抗體融合蛋白藥物的結(jié)構(gòu)表征分析。
高純度：可溶性高效表達(dá)，宿主蛋白殘留低，純度>95％；
高穩(wěn)定性：嚴(yán)格質(zhì)控，每批產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)活性和功能驗(yàn)證，保證產(chǎn)品質(zhì)量；
高酶活：酶活>20U/ul，可以特異性的酶切IgG抗體獲得所要的抗體片段；
無(wú)動(dòng)物源性：重組表達(dá)，全程未使用任何動(dòng)物源原料，無(wú)外源性病毒污染。
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IdeS Protease——特異性切割I(lǐng)gG，一個(gè)挑剔的工具酶
TEV Protease
高活性、高特異性，去標(biāo)簽首選
TEV蛋白酶（重組型）是經(jīng)基因工程改造后的重組蛋白酶，可特異性識(shí)別Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列，它與腸激酶 、凝血酶、Factor Xa、SUMO等蛋白酶相比，具有高活性和高特異性的雙重特點(diǎn)，已成為融合蛋白表達(dá)后去除標(biāo)簽的首選蛋白酶。
rb-EK
高專一性、高效酶切、比活性高
重組牛腸激酶（rb-EK）是一種絲氨酸蛋白水解酶，能高效專一地識(shí)別蛋白質(zhì)中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys（DDDDK）序列，并在賴氨酸（Lys，K）的C端水解肽鍵，產(chǎn)生切割，在生物體內(nèi)水解胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐鹊鞍酌?。由于腸激酶具有高度專一性和高效酶切特性，廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)。天然腸激酶由1條115 kDa的重鏈和1 條35 kDa的輕鏈組成，重鏈起錨定細(xì)胞膜的作用，輕鏈具有全酶完整的催化活性。普健生物表達(dá)的牛腸激酶輕鏈活性核心區(qū)域，比活性更高，特別適用于基因工程融合蛋白的酶切。
PNGase F
PNGase F(肽N-糖苷酶F)是一種酰胺水解酶，主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。PNGase F可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖及雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。PNGase F不會(huì)去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。
3C Protease
3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶，在病毒復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性，能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵，識(shí)別位點(diǎn)為 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。普健生物將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶，該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點(diǎn)的融合蛋白，具有良好的生物學(xué)活性。同時(shí)，普健生物自產(chǎn)的3C蛋白酶融合有GST標(biāo)簽蛋白，有利于后期將其從酶切體系中去除。
SUMO Protease
SUMO蛋白酶識(shí)別完整的含100個(gè)氨基酸的SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）標(biāo)簽蛋白，并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來(lái)。與EK和TEV等蛋白酶的識(shí)別位點(diǎn)相比，由于其識(shí)別序列長(zhǎng)，所以SUMO蛋白酶酶切反應(yīng)有很高的特異性，且在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力，例如溫度（4-37℃）等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標(biāo)簽，便于使用親和層析的方法，去除SUMO蛋白酶，純化目的蛋白。本產(chǎn)品經(jīng)驗(yàn)證在 TBS pH 8.0 和 PBS pH 7.5 反應(yīng)體系中均可使用。
AtaGenix現(xiàn)有工具酶| 貨號(hào) |
工具酶 |
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ATE00001 |
TEV Protease |
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ATE00002 |
rb-EK |
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ATE00003 |
3C Protease |
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ATE00004 |
SUMO Protease |
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ATE00005 |
PNGase F |
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ATE00006 |
Taq DNA Polymerase |
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ATE00008 |
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase |
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ATE00009 |
Benzonase Nuclease |
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ATE00010 |
IdeS Protease |
