重組蛋白表達(dá)系列二
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)
展示案例：E.coli Expression System
在普健生物所擁有的五大蛋白表達(dá)系統(tǒng)中，眾所周知的基礎(chǔ)又經(jīng)濟(jì)的系統(tǒng)當(dāng)屬原核的大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)了。
大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)因其代謝途徑和基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制研究透徹、培養(yǎng)周期短、目標(biāo)基因表達(dá)水平高且遺傳背景清楚，是目前市面上應(yīng)用最廣泛的表達(dá)系統(tǒng)。
當(dāng)然大腸桿菌君，優(yōu)點(diǎn)多多，缺點(diǎn)也明顯--就是讓廣大原核科研汪談之色變的包涵體。
而普健生物作為一家專注于蛋白表達(dá)技術(shù)的研究型高新技術(shù)企業(yè)，通過(guò)對(duì)E.coli表達(dá)系統(tǒng)的豐富經(jīng)驗(yàn)以及熟練掌握，在E.coli系統(tǒng)上的蛋白可溶性表達(dá)成功率達(dá)到90%以上。
空口無(wú)憑，下面小編就給大家分享兩個(gè)案例：
CASE 1——PNGase F
PNGase F（肽 N-糖苷酶 F）是一種酰氨酶，可在 N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復(fù)合寡糖部分最內(nèi)側(cè)的 N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間進(jìn)行切割。PNGase F幾乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有的 N-連接糖（X=H 或寡糖），不會(huì)去除常見(jiàn)植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。
PNGase F采用普健大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)成功可溶表達(dá)，產(chǎn)量高達(dá)107.1mg/L，純度>95%，經(jīng)檢驗(yàn)活性較高。
P.S PNGase F酶有現(xiàn)貨哦，歡迎至普健生物官網(wǎng)留言訂購(gòu)。
以圖為鑒
Test Report
01
Expression test
PNGase F protein have expressed in strain No.1 and strain No.2 , the most optimal expression yield for PNGase F in native is strain No.1 , 16℃.
02
Fermentation and Purification
1L scale up purification test
Target protein purification profile
03
SEC AKTA purification
SEC AKTA purification result part A
04
Final QC
SDS-PAGE of fragment of SEC AKTA purification
CASE 2——Co-expression CKM/CKB
肌酸激酶（CK）是一個(gè)重要的能量調(diào)節(jié)酶，可逆催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷?；磻?yīng)，CK廣泛分布于心臟肌肉的包漿內(nèi)。CK有M和B兩個(gè)亞基組成，以此分為三個(gè)最基本的同工酶：CKMM、CKMB、CKBB。目前在臨床上應(yīng)用最多的是將CK與CKMB結(jié)合，用于急性心肌梗塞的早期診斷；此外，CKBB蛋白也被應(yīng)用在急性呼吸道感染、病毒性腹瀉等疾病的基礎(chǔ)研究中。
CKM/CKB采用普健大腸桿菌共表達(dá)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)可溶表達(dá)，并分別純化出有活性的CKMB和CKBB兩種酶，純度>95%。
P.S 該蛋白普健也有現(xiàn)貨哦，歡迎至普健生物官網(wǎng)留言訂購(gòu)。
01
Purification Test(Mixture of CKBB and CKMB)
Target protein purification profile
02
Purification Test（CKMB）
Target protein purification profile
03
Final Product
普健生物大腸桿菌表達(dá)服務(wù)
表達(dá)載體構(gòu)建
可提供多種表達(dá)載體，如pET、pGEX、pBAD、pCOLD系列等。
表達(dá)及純化測(cè)試
大規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)
多種表達(dá)套餐選擇
基礎(chǔ)套餐，增強(qiáng)套餐，高通量套餐
