支原體感染可引起人類的多種疾病，如呼吸道感染、關節(jié)炎和泌尿生殖道疾病等。研究表明，支原體可引起宿主細胞凋亡，并與疾病的發(fā)生發(fā)展過程有關。

支原體感染與細胞凋亡關系密切，不同種類的支原體引起的細胞凋亡在疾病的發(fā)生、發(fā)展及轉歸中作用也不同。支原體感染細胞后，可直接誘導凋亡，亦可通過局部細胞因子或其他物質間接誘導凋亡。

因此，研究支原體與細胞凋亡之間的關系，對闡明支原體致病機理和臨床上疾病的治療至關重要。

支原體種類繁多、分布廣泛，在細胞培養(yǎng)過程中，支原體污染率高達30%-60%，隨著細胞培養(yǎng)技術的廣泛應用，組織、細胞、疫苗等受支原體污染的現象越來越普遍。細胞受支原體污染一般難以察覺，而支原體又可以通過細胞濾膜，因此難以去除，是細胞培養(yǎng)面臨的一個世界性難題。

>>>>

支原體的檢測方法

目前，支原體的檢測方法有很多種，包括培養(yǎng)法、DNA 熒光染色法、酶法、PCR 法、ELISA 法、間接免疫熒光試驗、生化檢測法、直接血凝試驗、探針法、放射自顯影法等，每種方法各有利弊。傳統(tǒng)的支原體檢測方法通常耗時長，操作繁瑣，環(huán)節(jié)多，因此，選擇快速、準確、有效的檢測方法對控制原材料、細胞、生物制品的支原體污染十分重要。

現有一款現成的支原體檢測試劑盒，經實驗驗證，可快速、靈敏、有效的檢測支原體。

普健生物生產的支原體PCR檢測試劑盒是一款具有快速、靈敏、特異性高等特點的支原體檢測試劑盒，可用于細胞、培養(yǎng)基、動物血清等的支原體檢測。本產品通過聚合酶鏈式反應技術（PCR）特異擴增支原體16s rRNA 基因保守區(qū)域片段，進行支原體檢測，能夠檢測包括M. arthritidis，M. hominis，M. hyorhinis，M. fermentans，M. orale，M. salivarium，M. bovis，M. bovigenitalium，M.pneumoniae，M. pirum等在內的數十種常見支原體。

談完了支原體，現在我們來談談細胞凋亡這回事。

細胞凋亡（Apoptosis）是Kerr在1972年提出的，一般是指機體細胞在發(fā)育過程中或在某些因素作用下，通過基因調控的一種程序性細胞死亡。細胞凋亡與細胞生長、分化、消亡以及機體許多生理、病理過程有關。

細胞凋亡過程中，細胞的形態(tài)變化是特有的，表現為：細胞核固縮、染色質凝聚、胞漿濃縮，核染色質密度增高，凋亡小體形成，細胞核染色質DNA被降解為180~200bp寡核苷酸片段，在瓊脂糖凝膠電泳中呈典型的梯狀條帶（曾被認為是細胞凋亡判定的金標準之一）。

但是這種方法既不能檢測單個細胞水平的凋亡，又不能提供細胞發(fā)生凋亡所處的組織位置和細胞分化狀態(tài)等方面的信息。

有問題就有解決方法——TUNEL法

TUNEL法：由脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法。細胞凋亡晚期，染色體DNA雙鏈或單鏈斷裂而產生大量的粘性3-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將熒光素/酶標記的dUTP結合到DNA的3-OH末端，從而可進行凋亡細胞的檢測。

普健生物自產的TUNEL細胞凋亡試劑盒（Fluorescein-12），經過反復試驗、重重把關，現已行走于江湖。一起看一下，它能不能經受住考驗吧。

試劑盒優(yōu)點

1. 靈敏度高

背景染色極低，陽性染色強，可以在單個細胞水平檢測到細胞凋亡。同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。

2. 特異性好

TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞，也不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)，既可以把凋亡和壞死區(qū)分開，也不會把射線等誘導發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。

注意：極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發(fā)現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，最好同時檢測多個凋亡指標。

3. 快速方便

只需將固定好的細胞或組織經染色及洗滌后，即可置于熒光顯微鏡或者流式細胞儀下進行凋亡檢測，整個實驗操作僅需1-2小時即可完成。

4. 應用范圍廣

可以用于檢測冷凍切片或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。

5. 靈活

適于固定的細胞和組織，可以使樣品收集、儲存和運輸成為可能。

6. 質優(yōu)

每一批產品都經過嚴格的質檢。

詳情可點擊 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒

案例展示

TNBC 組織冷凍切片（200 ×）

LTEP 組織石蠟切片（200 ×）