摘要:
7 月 23 日,WHO召開緊級會議,隨后宣布猴痘構(gòu)成國際關(guān)注的全球突發(fā)公共衛(wèi)生事件。截至7月27日,全球已有78個國家和地區(qū)報告猴痘病例,合計超過1.8萬例,大多數(shù)在歐洲。
猴痘病毒( Monkeypox virus(MPXV)具有正痘病毒的典型形態(tài),形態(tài)與正痘病毒一致, 外形為圓角磚形或卵圓形,大小為200~400nm。磚形或卵圓狀,外被脂蛋白膜或封套,中間具有兩個含蛋白質(zhì)的側(cè)體,有1個厚膜核心,核心內(nèi)含很大的雙鏈DNA基因體。猴痘病毒的基因組為雙鏈DNA,長約197kb,基因組末端包含一個相同但方向相反的末端反向重復(fù)序列。該病毒包含190個開放閱讀框,其中4個位于末端反向重復(fù)序列中。
猴痘病毒核心蛋白:A29L, A35R, B6R, M1R, H3L
其實痘病毒存在兩種形式:成熟病毒粒子(mature virion,MV) 和脂質(zhì)膜 (extracellular enveloped,EV),EV有一層來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的包膜,此包膜在與細(xì)胞接觸后分解,露出外膜進而直接和細(xì)胞膜發(fā)生融合,隨后進行下游的感染。而MV可以直接和細(xì)胞膜進行融合,至少有12種MV參與融合,同時可以通過巨胞飲內(nèi)吞進入細(xì)胞,外膜與內(nèi)吞體膜在內(nèi)吞體里融合釋放出內(nèi)膜包繞的病毒核心。復(fù)制的場所是帶孔洞的內(nèi)膜中進行,之后孔洞閉合,病毒粒子進行下一步的成熟形成典型的痘病毒啞鈴形態(tài),標(biāo)志MV正式形成。最終完成的病毒粒子可以有兩種方式離開細(xì)胞:最主要的一種為細(xì)胞裂解,MV直接釋放。另一種是利用細(xì)胞的分泌轉(zhuǎn)運系統(tǒng),通過高爾基體分泌至細(xì)胞外,這種方式會使得病毒額外獲得一層被膜產(chǎn)生EV。
Fig2.痘病毒復(fù)制周期
普健生物聯(lián)合法國Proteogenix頂-級科學(xué)團隊,雙方通過對猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)和痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)的基因序列進行深入研究成功設(shè)計開發(fā)真核系統(tǒng)表達的猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)系列核心蛋白A29L、A35R、B6R、M1R、E8L以及相關(guān)具有生物學(xué)活性的中和抗體產(chǎn)品,助力疫苗、藥物、診斷試劑等不同方向的研究。
真核表達猴痘核心蛋白及相關(guān)中和抗體
Monkeypox virus/MPXV A29L
A29L是細(xì)胞內(nèi)成熟病毒(IMV)表面包膜蛋白(與牛痘病毒VACV,A27同源)。溶瘤痘苗病毒(VV)屬于痘病毒科中一擁有192kb雙螺旋DNA遺傳物質(zhì)的病毒,會在細(xì)胞質(zhì)中繁殖出具有鞘膜的病毒,進而感染其他不同種的哺乳動物細(xì)胞及個體.VV中的A27L基因能表達出一14kDa大小的鞘膜蛋白,此蛋白能與細(xì)胞表面上的硫酸乙酰肝素(Heparan Sulfate)作用使病毒跟細(xì)胞結(jié)合并且可催化細(xì)胞融合。
Monkeypox virus/MPXV A29L
Recombinant Monkeypox virus/MPXV A29L Protein
Monkeypox virus/MPXV A35R
A35R是細(xì)胞內(nèi)包膜病毒粒子(IEV)和細(xì)胞外包膜病毒粒子(EEV)的包膜成分,與脊索痘病毒A33R同源。痘苗病毒中的A33R在病毒粒子在細(xì)胞間的傳播中起著至關(guān)重要的作用,是疫苗開發(fā)的重要靶點,也有研究表明A35R是猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)血清學(xué)檢測的潛在靶點。
Recombinant Monkeypox virus/MPXV A35R Protein
Anti-Monkeypox virus/MPXV A35R Antibody (SAA0287)
Monkeypox virus/MPXV B6R
B6R是宿主范圍蛋白,位于細(xì)胞外包膜病毒粒子(EEV)的膜上,與牛痘病毒補體控制蛋白B5同源,參與補體激活的負(fù)調(diào)節(jié)。研究表明B5依賴于與A33或A34的相互作用,以定位到細(xì)胞內(nèi)包膜的位點,并能相互結(jié)合釋放到細(xì)胞外病毒體的包膜中。B5對于有效生產(chǎn)感染性EV至關(guān)重要,A33,A34,B5三者復(fù)合物在ER退出以及三種糖蛋白正確定位到包裹的細(xì)胞內(nèi)部位中起作用。
Recombinant Monkeypox virus/MPXV B6R/SL-159 Protein
Monkeypox virus/MPXV M1R
M1R與牛痘病毒L1蛋白同源,是一種在成熟IMV顆粒表面發(fā)現(xiàn)的跨膜蛋白。由L1R ORF編碼,高度保守,參與病毒粒子組裝,在病毒進入和成熟過程中發(fā)揮重要作用。L1是誘導(dǎo)低pH觸發(fā)的細(xì)胞-細(xì)胞融合所必需的,且對牛痘病毒復(fù)制至關(guān)重要。
Recombinant Monkeypox virus/MPXV M1R Protein
Anti-Monkeypox virus/MPXV M1R Antibody
Monkeypox virus/MPXV E8L
E8L是病毒入侵宿主細(xì)胞重要基因,在病毒入侵宿主完成復(fù)制的過程中作為MV的細(xì)胞表面結(jié)合蛋白與細(xì)胞表面的硫酸軟骨素結(jié)合,以提供病毒粒子附著在靶細(xì)胞上。有研究表明利用siRNA技術(shù)能有效拮抗Monkeypox virus的A6R和E8L基因,由此構(gòu)建siA6-a和si8 -d能破壞MPV復(fù)制。
Recombinant Monkeypox virus/MPXV E8L Protein
Anti-Monkeypox virus/MPXV E8L Antibody
Monkeypox virus/MPXV H3L
H3L是一種324個AA長的糖基轉(zhuǎn)移酶,位于病毒包膜上,在與宿主細(xì)胞的附著和隨后的痘病毒進入中起關(guān)鍵作用。研究表明,天花疫苗誘導(dǎo)的抗體與H3蛋白結(jié)合,分化簇 (CD8)+ T細(xì)胞將H3L識別為抗原,表明其免疫學(xué)意義。
Recombinant Monkeypox virus/MPXV H3L Protein
在完成上述猴痘病毒的核心抗原,抗體研發(fā)的同時,猴痘病毒(Monkeypox virus/MPXV )其他抗原系列C19L,D13L,B2R/Hemagglutinin,A44R,E8L,F(xiàn)12L/MPXVgp044,A26L,A27L,B5R,A33R,A36R,D14L,A14L,B21R和I1L也已完成了抗原和多抗研發(fā)工作,目前全部現(xiàn)貨庫存。
我們還有在研發(fā)配對猴痘病毒(Monkeypox virus/MPXV )相關(guān)試劑盒系列;
猴痘病毒(Monkeypox virus/MPXV )抗原檢測試劑盒:
Monkeypox Virus (MPXV) A29L Antigen ELISA Kit
Monkeypox Virus (MPXV) M1R Antigen ELISA Kit
Monkeypox Virus (MPXV) H3L Antigen ELISA Kit
Monkeypox Virus (MPXV) E8L Antigen ELISA Kit
Monkeypox Virus (MPXV) A35R Antigen ELISA Kit
猴痘病毒(Monkeypox virus/MPXV )抗體檢測試劑盒:
Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit (A29L)
Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit (M1R)
Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit (H3L)
Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit (E8L)
Human Anti-Monkeypox Virus (MPXV) IgG ELISA Kit (A35R)
參考文獻:
[1]Subunit recombinant vaccine protects against monkeypox. J Immunol. 2006 Aug 15;177(4):2552-64. doi: 10.4049/jimmunol.177.4.2552. PMID: 16888017.
[2]Outbreak of human monkeypox in Nigeria in 2017-18: a clinical and epidemiological report. Lancet Infect Dis. 2019 Aug;19(8):872-879. doi: 10.1016/S1473-3099(19)30294-4. Epub 2019 Jul 5. PMID: 31285143.
[3]A Nucleic Acid-Based Orthopoxvirus Vaccine Targeting the Vaccinia Virus L1, A27, B5, and A33 Proteins Protects Rabbits against Lethal Rabbitpox Virus Aerosol Challenge. J Virol. 2022 Feb 9;96(3):e0150421. doi: 10.1128/JVI.01504-21. Epub 2021 Dec 1. PMID: 34851148; PMCID: PMC8826804.
[4]Mapping and functional analysis of interaction sites within the cytoplasmic domains of the vaccinia virus A33R and A36R envelope proteins. J Virol. 2003 Apr;77(7):4113-26. doi: 10.1128/jvi.77.7.4113-4126.2003. PMID: 12634370; PMCID: PMC150634.
[5]Vaccinia virus induces cell fusion at acid pH and this activity is mediated by the N-terminus of the 14-kDa virus envelope protein. Virology. 1990 Sep;178(1):81-91. doi: 10.1016/0042-6822(90)90381-z. PMID: 2389560.
[6]Molecular Evidence of Human Monkeypox Virus Infection, Sierra Leone. Emerg Infect Dis. 2019 Jun;25(6):1220-1222. doi: 10.3201/eid2506.180296. Epub 2019 Jun 17. PMID: 30900976; PMCID: PMC6537715.
[7]Inhibition of monkeypox virus replication by RNA interference. Virol J. 2009 Nov 4;6:188. doi: 10.1186/1743-422X-6-188. PMID: 19889227; PMCID: PMC2777875.
[8]Rapid protection in a monkeypox model by a single injection of a replication-deficient vaccinia virus. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Aug 5;105(31):10889-94. doi: 10.1073/pnas.0804985105. Epub 2008 Aug 4. PMID: 18678911; PMCID: PMC2495015.